1.Výběr správné buněčné linie
Při výběru vhodné buněčné linie pro váš experiment zvažte prosím následující kritéria:
a. Druhy: Buněčné linie jiného než lidského původu a buněčné linie jiných než primátů mají obvykle méně omezení biologické bezpečnosti, ale nakonec váš experiment určí, zda použít kulturu konkrétního druhu.
b.Funkce: Jaký je účel vašeho experimentu?Například buněčné linie odvozené z jater a ledvin mohou být vhodnější pro testování toxicity.
c. Omezené nebo kontinuální: Přestože výběr z omezené buněčné linie vám může poskytnout více možností pro vyjádření správné funkce, kontinuální buněčné linie se obecně snáze klonují a udržují.
d.Normální nebo transformované: Transformované buněčné linie mají obvykle vyšší rychlost růstu a vyšší účinnost naočkování, jsou kontinuální a vyžadují méně séra v kultivačním médiu, ale jejich fenotyp prošel trvalými změnami prostřednictvím genetické transformace.
e. Podmínky a charakteristiky růstu: Jaké jsou vaše požadavky na rychlost růstu, hustotu nasycení, účinnost klonování a schopnost růstu suspenze?Například pro expresi rekombinantních proteinů ve vysokých výtěžcích možná budete muset vybrat buněčné linie, které mají rychlé rychlosti růstu a schopnost růst v suspenzi.
f. Další kritéria: Pokud používáte omezenou buněčnou linii, je k dispozici dostatek zásob?Je buněčná linie plně charakterizována, nebo si to musíte sami ověřit?Pokud používáte abnormální buněčnou linii, existuje ekvivalentní normální buněčná linie, kterou lze použít jako kontrolu?Je buněčná linie stabilní?Pokud ne, jak snadné je naklonovat jej a vytvořit dostatek zmrazeného materiálu pro váš experiment?
2. Získejte buněčné linie
Můžete si vytvořit vlastní kulturu z primárních buněk, nebo si můžete vybrat nákup zavedených buněčných kultur od komerčních nebo neziskových dodavatelů (tj. buněčných bank).Renomovaní dodavatelé poskytují vysoce kvalitní buněčné linie, které byly pečlivě testovány na integritu a zajišťují, že kultura je bez kontaminantů.Doporučujeme nepůjčovat si kultury z jiných laboratoří, protože je u nich vysoké riziko kontaminace buněčných kultur.Bez ohledu na jeho zdroj se prosím ujistěte, že všechny nové buněčné linie byly testovány na kontaminaci mykoplazmaty, než jej začnete používat.
Čas odeslání: 01.02.2023